این محیط کشت، توسط اسپاسکی در دانشگاه کلمبیا تهیه شده و سالیان دراز است که با اطمینان مورد استفاده قرار می گیرد.

برای هر بطری ¼ لیتری، مواد مورد نیاز جهت تهیه محیط کشت عبارتند از:

40 سی سی آب

2/5 گرم آرد

1/8 گرم مخمر

1 گرم آگار

0/5 سی سی اسید پروپیونیک

1.5 گرم شکر

نکته: گلوکز و مخمر جهت تغذیه، آرد گندم و آگار جهت قوام محیط کشت، اسید پروپیونیک خاصیت قارچ کشی دارد.

روش کار

1- داخل بشر کوچک آرد، مخمر و شکر اضافه می کنیم و داخل بشر بزرگ آگار می ریزیم.

2- با استوانه مدرج 20 سی سی آب مقطر درون بشر کوچک می ریزیم و هم می زنیم تا حل شود.

3- درون بشر بزرگ 30 سی سی آب مقطر میریزیم و روی شعله قرار می دهیم. تا وقتی که رنگ محلول طلایی رنگ شود، به هم می زنیم تا به جوش بیاید.

4- بعد از به جوش آمدن، بلافاصله محلول درون بشر کوچک را به بشر بزرگ اضافه می کنیم و می جوشانیم. بعد از جوشاندن کنار می گزاریم تا خنک شود.

5- بعد از خنک شدن، درون ظرف محیط کشت قرار داده و برای درب آن از پنبه استفاده می کنیم.

محیط کشت ذرت:

1000 سی سی آب

50 گرم آرد ذرت

10 گرم آرد گندم

50 گرم مخمر

20 گرم آگار

10 سی سی اسید پروپیونیک

31.5 گرم شکر