تمام گیاهان سبز رنگ دارای رنگدانه کلروفیل می باشند محل قرارگرفتن کلروفیل کلروپلاست می باشد برای بررسی رنگیزه کلروفیل ابتدا باید این رنگدانه را از بافت گیاهی استخراج نمود . پس این آزمایش شامل دو مرحله استخراج و سنجش می باشد

الف) استخراج :

ابتدا برگ اسفناج را شسته و خشک نموده سپس 5/0 گرم از آن را با ترازو و وزن نموده در هاون چینی با 25 سی سی استن 80% به عنوان حلال سابیده سپس به کمک یک کاغذ صافی و قیف محلول سبز رنگ را صاف نمود اگر تکه های برگ هنوز سبز رنگ باشد مجدداً به آن 25سی سی استن اضافه نموده و آن را سابیده تا کاملا بی رنگ شود.

نکته هر چقدر مراحل فوق با سرعت بیشتری انجام شود نتایج دقیق تر خواهد بود به دلیل فرار بودن حلال .

ب) سنجش کلروفیل: حجم نهایی عصاره مورد استفاده 50 سی سی می باشد وزن نمونه 5/0 گرم  میزان جذب عصاره فوق را به کمک دستگاه اسپیکتروفتومتر در سه طول موج 645،652 ،663 نانومتر را خوانده سپس از طریق فرمول ها زیر مقدار کلروفیلb,a و کل را محاسبه نمایید از استن 80% به عنوان شاهد دستگاه اسپکتروفتومتر استفاده نمایید.

دلیل بررسی درسه طول موج ذکر شده را توضیح دهید.

قله جذب کلروفیل a در 663 نانومتر می باشد.

قله جذب کلروفیل b  در 645 نانومتر می باشد

و دلیل بررسی در طول موج 652 این است که این طول موج محل برخورد دو نمودار جذب کلروفیل a , b می باشد.

مقدار عددی کلروفیل a , b در گیاهان :

a=2b